孔雀石綠ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被孔雀石綠抗原，樣品殘留的孔雀石綠和微孔條上預(yù)包被的抗原共同競爭抗孔雀石綠抗體，加入酶標(biāo)二抗后，經(jīng)TB底物顯色，樣品吸光度值與其殘留物孔雀石綠呈負相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)出線比較再乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中孔雀石綠的含量。
一、產(chǎn)品規(guī)格參數(shù)：
名稱：孔雀石綠ELISA檢測試劑盒
規(guī)格：48T/96T
檢測方法：ELISA方法
檢測波長：450/630nm
品牌：臻科生物
適用范圍：僅供科研
檢測樣本種類：肌肉和肝臟組織、尿樣、血清、飼料、動物組織、水產(chǎn)、蜂蜜、牛奶等。
貯藏：試劑盒于2-8℃保存，避免冷凍。
保質(zhì)期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。
二、檢測步驟：
測定前應(yīng)須知：
1、使用之前將所有試劑和需用板條的溫度回升至室溫(20一25℃)。
2、使用之后立即將所有試劑放回28℃。
3、在LISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是LISA測定程序中的要點。
4、在所有恒溫孵育過程中，避免光線照射，用蓋板膜封住微孔板。
具體操作：
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫(20~25℃)平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入白封袋，保存于28℃。
3、洗滌作液在使用前也需回溫。
4、編號：將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣品孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品：加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品5041/孔到對應(yīng)的微孔中，然后加入抗試劑5041/孔，輕輕振蕩混，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30mn。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250μ1/孔，充分洗滌45次，每次間隔10s,用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、加酶標(biāo)物：加入酶標(biāo)物100μ1/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復(fù)洗板步驟6。
8、顯色：加入底物液A液50μ1/孔，再加底物液B液50μ1/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15~20min。
9、測定：加入終止液50μ1/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450m處（建議用雙波長450/630m檢測，請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù))，測定每孔0D值。（若無酶標(biāo)儀，則不加終止液用日測法可進行判定)。
三、注意事項：
1、室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進行下一步操作。
3、混合要均勻，洗板要*，在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性。
4、在所有孵育過程中，用蓋板膜封住微孔板，避免光線照射。
5、不要使用過了有效期的試劑盒，不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個單位（A450nm< 0.5 ）時，表示試劑可能變質(zhì)。
7、反應(yīng)終止液有腐蝕性，避免接觸皮膚。
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